男性不育症患者的精液各项参数与解脲支原体感染相关性分析
文章导读:收集103例不育男性患者,检测解脲支原体感染情况以及精液pH值、液化时间、精液的体积、精子密度、活力和正常形态率,并按照是否感染解脲支原体分为阳性组和阴性组,比较两组精液的各项参数的差异是否有统计学意义。 结果:与解脲支原体感染阴性组比较,阳性组的患者的精液密度、活力和正常形态率显著降低,精液液化时间显著增长(P<0.05),而两组患者的精液的pH值和精液体积的比较没有统计学意义。 |
据研究目前全球有近15%的夫妇不孕不育,其中男性不育的因素高达50%,男性不育越来越受到大家的重视。而男性不育的原因中生殖道感染占有重要地位,早有报道不育男性患者的生殖道感染率在10%~40%。解脲支原体寄居在健康人的泌尿生殖道中,是人类泌尿生殖道中常见的病原菌,它可以削弱男性生殖系统的功能,降低精子细胞的功能,还可以引发附睾炎和睾丸炎。有研究表明解脲支原体感染的患者的精液密度和活力与非感染患者相比较都有所降低。而另一些研究认为生殖道感染解脲支原体并不能影响精子的质量。解脲支原体感染与男性不育的研究是存在争议的。本研究旨在讨论解脲支原体感染与精子多个参数如精液液化时间、pH值、精液的体积、精液密度、精子的活力和正常形态率之间的关系。
1 材料和方法
1.1 研究对象
选取自2015年10月至2016年10月在哈尔滨科学大学附属第一医院生殖医学科男科诊室的不育男性患者共103例,年龄在25~48岁。入选的所有男性患者经我院医学伦理委员会通过,均签署知情同意书,并做过解脲支原体检查、精液标准化检查和精子形态分析。入选标准为一般男性婚后在未避孕情况下进行正常性生活达1年以上不育,排除外伤及遗传性疾病家族史,无性功能障碍病史,体检未发现有生殖器官发育异常,排除女方因素未使女方受孕的男性,经男科医生临床诊断为男性不育症的患者。
1.2 精液采集
不育男性患者采集精液之前需排尿,要求不能同房2~7d,采集过程需要在生殖中心的采精室中进行,事先用消毒液清洗双手,手淫法留取精液标本,将所有精液射入到取精杯中,立即送到标本接收处的37℃恒温台上。
1.3 解脲支原体的检查
选用贝瑞特生物技术有限公司提供的解脲支原体培养试剂盒,严格按照说明书进行操作。把粘有精液的拭子插入到培养液中混匀,接种到各个培养孔中,24h和48h观察是否有解脲支原体的生长。培养孔变成红色为阳性,代表有解脲支原体;黄色为阴性,代表没有解脲支原体的生长。
1.4 精液参数的分析
必须严格按照世界卫生组织推荐的方法进行。
1.4.1 精液的体积观察 用改良的广口带有刻度的玻璃量杯准确测量
1.4.2 精液密度的检查 用加样器混匀精液标本,用多聚甲醛固定活动的精子,加入到makler 板上,人工显微镜下计数精子的浓度,单位106/mL。
1.4.3 精子活力的检查 参照世界卫生组织《人类精液检查与处理实验室手册》(第4版)将精子活力分内四个等级,a级:快速向前运动;b级;慢速或呆滞向前运动;c级:非前向运动或原地打转;d级:不动。由从事生殖医学专业检验人员进行分析研究,至少计数200个精子。精子活力用a+b级精子%表示。
1.4.4 精子形态分析 制备精液涂片,用Diff-Quick快速染色法进行染色,干燥后进行显微镜下观察,精子包括头、颈、中段、主段和末段。正常形态精子为精子头部光滑、轮廓规则,大体上成椭圆形。顶体区清晰可辨,占头部的40%~70%,顶体区没有大空泡,并且不超过两个小空泡,空泡大小不超过头部的20%,顶体后区没有空泡;精子中段细长规则,主轴应与头部在一条直线上,没有过量残留胞质;主段长度约为10个头部;尾部没有卷曲和折角。至少观察200个精子的形态,计算正常精子形态率。
1.5 统计学分析
用SPSS17.0统计软件进行分析,采用两独立样本t检验,计量资料用(x±s)表示,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
在103例不育男性患者的精液标本中,检测到有27例解脲支原体阳性,76例解脲支原体阴性。解脲支原体阳性组精子液化时间(18.28±1.36) min较解脲支原体阴性组 (16.22±1.42) min长,差异有统计学意义(P<0.05);解脲支原体阳性组精液密度(48.94±26.79)×106/mL显著低于解脲支原体阴性组(72.31±29.51)×106/mL,差异有统计学意义(P<0.05);解脲支原体阳性组的精子的活力(34.52±9.61)%比解脲支原体阴性组的精子的活力(46.67±5.68)%明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);解脲支原体阳性组的精子的正常形态率(8.52±4.23) %与解脲支原体阴性组的正常精子形态率(11.32±3.17)%相比较显著升高,并且差异具有统计学意义(P<0.05);而两组精液的pH值和精液体积比较没有统计学意义。
3 讨论
男性不育的原因有很多,男性不育与生殖器官先天异常、遗传性疾病、内分泌性和自身免疫性不育、感染、环境及理化等因素有关。早有研究表明男性不育中有10%~40%的因素与解脲支原体感染有关。解脲支原体是脲原体菌属中唯一的一个种,直径仅有0.2~0.3μm,无细胞壁,呈多形性。是目前发现的最小、最简单的具有自我繁殖能力的细胞,其基因组也是原核生物中最小的。解脲支原体是条件致病菌,可粘附在泌尿生殖道的黏膜及上皮细胞上,导致泌尿生殖道感染,主要引起精囊和前列腺的炎症,因而常出现精液液化延迟,最主要的原因是精液液化因子缺乏。解脲支原体还能侵入到生精小管,粘附并破坏生精细胞,引发精母细胞结构的改变,干扰精子的正常发生。它可以粘附在精子的头部和尾部,粘附物使精子泳动受阻,干扰精子的运动,导致活力下降。解脲支原体摄取精子内的营养物质,并代谢产生毒素,造成精子膜缺陷,从而影响精子的形态。并且解脲支原体产生的神经氨酸酶类物质可以干扰精子与卵细胞的结合。解脲支原体感染还可引起精子顶体膜破损,顶体的完整性缺失,顶体酶流失,导致顶体反应性降低,因此精子的受精功能降低导致患者不育。另有一些研究解脲支原体致男性不育还有免疫方面的因素,解脲支原体、精子和精子膜蛋白与抗解脲支原体血清或抗人精子血疫反应,产生自身抗体而影响受孕。解脲支原体感染后精桨中TNF-α显著升高,TNF-α抑制细胞蛋白运转中的生物合成,对新生细胞有细胞毒害作用,它还可减少人绒毛膜促性腺素诱导间质细胞睾酮的生成,对精子的发生、发育、成熟、获能、穿透能力和受精能力起着重要作用。在本研究中,解脲支原体感染阳性患者的精液的液化时间延长,其精液密度、精子的活力和正常形态率较解脲支原体阴性患者降低,精液液化时间、精液密度、精子的活力和正常形态率都是判断精液质量的重要参数,由此可见解脲支原体与男性不育关系显著。解脲支原体的感染不仅影响精液的质量,还可以交叉感染给女性,导致不孕症、流产和死胎,更加增加不孕不育的几率。临床工作者和备孕夫妇应该加强这方面的重视,做到早检测早治疗,减低解脲支原体对不孕不育的影响。
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