三种不同人群HPV检测DNA分型结果及其临床意义探讨
文章导读:随机选择2015年7月至2016年7月间我院皮肤科门诊诊断的109例尖锐湿疣患者为观察组,选择同时期入院检查的117例无症状的高危自检者为B对照组,选取112例定期健康检查、孕前及婚前正常体检者为A对照组。用镊子取观察组尖锐湿疣患者的可见疣体组织0.10~0.50 mm3;A和B对照组无疣体的参试者,用专用的HPV采样刷在女性外阴或宫颈脱落细胞,男性在冠状沟或尿道口进行采样。按照实验室指标对参试者进行检测后,并结合医院自行设计的有关尖锐湿疣的规范准则,详细记录参试者的各项测量指标,最后对收集数据进行统计学分析。结果:经过检查,观察组患者的阳性检出率为93.58%,B对照组的阳性检出率为23.08%,A对照组的阳性检出率为4.46%,A对照组的阳性检出率明显低于B对照组和观察组,且B对照组明显低于观察组,差异有统计学意义(P<0.05)。参试者的HPV-DNA分型以感染单型6/11型为主,其次是16/18型和6/11+16/18混合型。其中单型6/11型明显高于16/18型和6/11+16/18混合型,差异对比有统计学意义(P<0.05)。109例尖锐湿疣患者阳性例数为102例,其中单一感染患者为81(74.31%),多重亚型感染为21(19.27%),其中低危型是单一感染的主要类型,高危型是多重感染的主要类型。 |
尖锐湿疣是一种常见的性传播疾病,主要由人类乳头病毒(HPV)引发的,又称病毒疣、生殖器疣或性病疣等,多发于19~55岁的人群。目前对于尖锐湿疣的治疗方案较多,都取得较好的治疗的效果,但是病情易反复的特点引起医疗工作者的关注。近年来,人们对性病的关注度逐渐加强,临床上加强对无症状高危人群及尖锐湿疣患者的检测筛选,而常用的诊疗方法是HPV-DNA分型检测,我院并对其检测的灵敏性和准确性进行了分析。现报道如下。
1 材料与方法
1.1 一般资料
随机选择2015年7月至2016年7月间我院皮肤科门诊诊断的109例尖锐湿疣患者为观察组,所有患者通过细胞学检查均符合尖锐湿疣诊断标准,常见的临床表现有乳头状、菜花状、鸡冠状肉质块状物;其中男/女69/40例,年龄为18~71岁,平均年龄为(35.79±6.73)岁。随机选择同时期入院检查的117例无症状的高危自检者为B对照组,患者没有发现疣体但疑似HPV感染且患者进行分泌物检测分析,其中主要包括配偶或性伴侣患有尖锐湿疣、梅毒、宫颈炎、淋病、衣原体性尿道炎及不洁行为等高危自检者;其中男/女73/44例,年龄为17~72岁,平均年龄为(36.15±6.94)岁。选取112例定期健康检查、孕前及婚前正常体检者为A对照组,其中男/女67/45例,年龄为17~73岁,平均年龄为(36.91±6.17)岁。本研究获得医院伦理委员会许可,且参试者均签署知情同意书,三组患者的年龄、性别比例、平均年龄及既往病史如心脏病、糖尿病、高血压等无显著性差别(P>0.05)。排除有盆腔放射史的患者,排除子宫切除的患者,排除妊娠患者妇女。
1.2 方法
用镊子取观察组尖锐湿疣患者的可见疣体组织0.10~0.50 mm3;A和B对照组无疣体的参试者,用专用的HPV采样刷在女性外阴或宫颈脱落细胞,男性在冠状沟或尿道口进行采样。所有的采集的样品保存在细胞保存液中,保存在4℃冰箱,从采样到检测时间间隔不超过3d。对HPV亚型的分型检测严格参照试剂盒说明书操作,通过核酸分子快速导流基因杂交芯片技术进行。具体步骤是首先进行DNA提取制备样本,其次进行聚合酶链的扩增,再次进行核酸分子快速导流杂交,最后酶试剂显色,并通过酶试剂相应位点的显色判断基因的型别,如果出现多个阳性点即为混合类型感染。
1.3 观察指标
实验室指标对参试者进行检测后,并结合医院自行设计的有关尖锐湿疣的规范准则,详细记录参试者的各项测量指标,最后对收集数据进行统计学分析。采用PCR法检查宫颈分泌物HPV-DNA分型检查。21种HPV基因型分为高危型、中危型和低危型,其中高危型包含16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型13种;中危型HPV包括53、66和cp830型3种;低危型HPV包括6、11、42、43、44型5种。检查结果阳性点显示为清晰可见的HPV分型,1个阳性点的为单一感染;2个阳性点的为双重感染,3个阳性点的为三重感染;≥4个阳性点的为多重感染。
1. 4 统计学分析
结果中的各项数据的分析采用SPSS18.0进行,计量资料表示为(x±s),组内比较采用方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,计数资料的比较采用χ2检验,当P<0.05时,差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 对比三组参试者的HPV阳性检出率
经过检查,观察组患者的阳性检出率为93.58%,B对照组的阳性检出率为23.08%,A对照组的阳性检出率为4.46%,A对照组的阳性检出率明显低于B对照组和观察组,且B对照组明显低于观察组,差异有统计学意义(P<0.05)。
2.2 对比三组参试者HPV的优势型别
参试者的HPV-DNA分型以感染单型6/11为主,其次是16/18型和6/11+16/18混合型。其中单型6/11型明显高于16/18型和6/11+16/18混合型,差异对比有统计学意义(P<0.05)。
2.3 对比观察组尖锐湿疣患者HPV亚型多重感染情况
109例尖锐湿疣患者阳性例数为102例,其中单一感染患者为81例(74.31%),多重亚型感染为21例(19.27%),其中低危型是单一感染的主要类型,高危型是多重感染的主要类型。
3 讨论
尖锐湿疣是由一种DNA病毒人乳头瘤病毒(HPV)所引发的一种性传播疾病,它可以诱发恶性肿瘤和癌前病变。近年来,尖锐湿疣的发病率逐年升高,因此备受医疗工作者的关注。其中有一部分患者是无症状或症状不明显的高危人群,即亚临床状态,因此提升检测手段和技术的准确性和灵敏度实现尖锐湿疣的早诊断、早发现、早治疗。研究证明,HPV的DNA分型有80余种,其中20种左右与肿瘤有关,约35种可引发女性阴道感染,高危型HPV与宫颈上皮瘤及宫颈癌的病变有关,低危型HPV会引起患者尖锐湿疣。HPV的感染因素多种多样,常见的有过高的性激素含量、口服避孕药、病毒感染、性生活年龄过早及免疫力低下等。尖锐湿疣患者的初期临床症状是淡红色细小丘疹,逐渐增多、增大,表面不平,常以单个或多个聚集出现在肛周或生殖器。治疗尖锐湿疣的常选用的方法是激光疗法、治疗诱因、化学疗法、手术治疗及提高机体免疫力等。了解尖锐湿疣患者HPV的感染型别及感染诱因具有重要的临床意义。因此,对HPV进行早检测、早治疗,并明确确诊其基因型,为治疗HPV感染及预防恶性肿瘤的临床治疗具有重要的意义。近年来,生物学检测技术的进步推动了生物检测法应用于临床检测,经过大量的分子生物学研究和临床实践证明,不同HPV亚型的晚期的L1区DNA序列的变化很大,为HPV不同亚型分型的重要标准,这种方法可以快速、准确、微量检测、灵敏度高、特异性好等特点,被广泛应用于HPV的分型检测。研究显示,经过检查,尖锐湿疣患者的阳性检出率为93.58%,无症状高危自检者的阳性检出率为23.08%,正常人的阳性检出率为4.46%,正常人的阳性检出率明显低于无症状高危自检者和尖锐湿疣患者。对HPV基因常见分型进行检测,正常人HPV-DNA 6/11型4例,16/18 型1例;无症状高危自检者6/11型16例,16/18型9例,6/11+16/18型2例;尖锐湿疣患者HPV-DNA 6/11型54例,16/18 型37例,6/11+16/18型11例。参试者的HPV-DNA分型以感染单型6/11为主,其次是16/18型和6/11+16/18混合型。其中单一型6/11型明显高于16/18型和6/11+16/18混合型。这样不仅可以发现患者的异常细胞,还可以区分出将来有可能患病的妇女,提高高危妇女患者的就诊率。109例尖锐湿疣患者阳性例数为102例,其中单一感染患者为81例(74.31%),多重亚型感染为21例(19.27%),其中低危型是单一感染的主要类型,高危感染以多重感染的主要类型。 HPV-DNA分型检测可提高3种人群诊断的准确率,对及时发现和预防、治疗尖锐湿疣具有临床意义。综上所述,尖锐湿疣患者、无症状的高危自检者及正常人的分型检测中以6/11型HPV为主,无症状高危自检者的阳性率较高,临床上应加强对此类无症状高危自检者的HPV-DNA的分型检测。
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